重组蛋白在抗原制备、蛋白相互作用、酶学分析、药物靶标研究等方面应用广泛，选择合适的重组蛋白表达方法对于能否及时获得所需数量和质量的重组蛋白至关重要。常规的重组蛋白表达系统我们并不陌生，主要有原核表达系统、哺乳动物细胞表达系统、酵母表达系统、枯草芽孢杆菌表达系统、昆虫杆状病毒表达系统，各有优缺点，其中哺乳动物细胞表达系统因其表达的蛋白更接近天然状态，且最容易保留生物活性，而备受关注，但表达量通常是一大难题。

临床及实验室研究中，经常要求在短时间内生产一定量的重组蛋白。稳定表达细胞株生产重组蛋白过程繁琐且周期长；瞬时基因表达技术则能在短期内高表达重组蛋白，因而得到广泛应用。随着生物医药研究技术的发展，快速生产毫克到克级别的重组蛋白瞬时表达体系被广泛用于新药筛选和临床前研究。

1  XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统简介

XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统是Atagenix 自主开发的一套高效表达蛋白和抗体的瞬时表达系统，主要包括以下组分：① XtenCHO^TM cell line；② ATGfect solution；③ Basic expression medium/ATGfeed medium。 该系统不仅表达量高（一般为200-400mg/L, 部分抗体的表达量高达1g/L），而且工艺简单，既适用人源化抗体小体积高通量筛选，又适用于大体积的放大生产。

2  XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统优势

① XtenCHO^TM 细胞是Atagenix 开发的一种经基因改造的重组CHO细胞株，使用含配套元件的载体，可以使转染进入细胞的表达载体拷贝数增加，延长游离质粒在细胞内的停留时间，从而使载体携带的目的基因获得高水平，持续表达。

②  XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统改进了CHO常规转染方法，采用新颖的高密度转染方法和特殊的细胞培养模式，提高了转染后的细胞活率，使转染细胞存活时间从常规6-7天延长至10-14天，进一步提高了目的蛋白的产量。

③ XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统的转染试剂、表达培养基和补料培养基相较于常用的阳离子脂质体转染试剂、商业化CHO 瞬转培养基以及补料培养基，成本大大降低，更适用于工业生产，在规模较大的重组蛋白瞬时表达生产中更能体现其性价比高的特点。

3  XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统测试结果    

3.1 与其它商业化表达系统的比较

使用XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统和其它公司的两个商业化CHO 瞬转表达系统CHO Expression system 1 和 CHO Expression system 2 同时对一个抗体进行表达，转染后的细胞密度和活率监测及抗体产量见图1和图2：

图1 不同表达系统转染后细胞密度活率监测

图2 不同表达系统表达相同抗体产量比较

3.2  不同治疗性重组抗体表达测试

选取4种典型的治疗性重组抗体序列，用XtenCHO^TM 高密度瞬转表达系统进行表达测试。 抗体产量见图3：

图3 XtenCHO^TM 系统表达不同抗体的产量测定

Ab1: Pembrolizumad, Ab2: Utomilumab, Ab3: PF, Ab4: Claudiximab