普健生物(武汉)科技有限公司(AtaGenix)
技术服务
杆状病毒-昆虫表达系统

服务简介

杆状病毒-昆虫表达系统,凭借其易于筛选、具有翻译后修饰功能及高表达水平的优势,成为当今应用较广泛的真核表达系统之一,普健生物的杆状病毒-昆虫蛋白表达服务,采用经典的Bac-to-Bac 表达体系,并加以改进。在表达方式(胞内或分泌),信号肽选择,细胞培养方式及细胞选择(Sf9Sf21Hi-5)方面有着丰富的案例经验。可为国内外药企,高校及科研客户提供高达200L的蛋白表达纯化服务。

普健生物优势

1. 高成功率:普健生物杆状病毒-昆虫表达系统蛋白表达目前还没有失败案例。

2. 成熟的设计方案及条件筛选体系:根据蛋白性质选择胞内表达或分泌表达,针对分泌表达可为客户选择高效分泌信号肽。表达细胞:Sf9Sf21Hi-5,通过测试不同时间的MOI,摸索最佳表达条件以达到最优表达量。

3. 大规模生产:可同时进行200 L体系的表达及纯化。 

4. 一站式服务:基因设计及优化病毒生产蛋白表达条件优化、蛋白纯化及后续加工处理、数据及报告整理

服务内容

服务名称

服务内容

服务周期

表达体系选择

表达载体:常规商业化载体系列、经普健生物改造后的表达载体

表达细胞:Sf9 Sf21 Hi-5

 

表达载体构建

基因优化及设计、基因合成及亚克隆

2-4周

表达及纯化测试

转化及Bacmid鉴定、P1代病毒生产及表达测试(SDS-PAGE and/or WB)、P2代病毒生产及MOI测试(SDS-PAGE and/or WB)、最优条件200ml扩大及纯化测试、标签去除测试(可选)

3-5周

1-10L表达及纯化

蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB 鉴定纯化后蛋白、MS鉴定(可选)、标签去除(可选)

1-3周

大规模发酵与纯化

蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB 鉴定纯化后蛋白、MS鉴定(可选)

10-20L

2-4周

20-50L

3-6周

50L 以上

4-12周

表达案例

该蛋白服务订单,包含1L 表达及纯化。由于表达量达到了368mg/L(纯化后),纯化测试即可获得足量的蛋白。经客户验证,证明其活性良好,我们即刻交付约60mg 蛋白,该订单在纯化测试阶段结束。1L 放大及纯化费用退还予客户。