普健生物(武汉)科技有限公司(AtaGenix)
技术服务
酵母表达系统

服务简介

酵母表达系统,是工业微生物中应用较广泛的系统,遗传和生理背景清楚而且安全,结合了原核和高等真核表达系统的优点:生长快、培养成本低廉、操作简单并且蛋白翻译后能进行正确加工、修饰和折叠、表达的重组蛋白更加稳定、适于表达真核生物基因和制备有功能的蛋白质。

普健生物优势

1. 表达宿主包括酿酒酵母和毕赤酵母,蛋白表达成功率高。

2. 可提供多种酵母表达载体:有适用于分泌表达及胞内表达的营养缺陷型表达载体;有可以直接转化野生型毕赤酵母并且高效筛选表达菌株的载体等。

3. 丰富的酵母表达经验:可根据客户需求选择合适的载体,为客户进行整个表达体系的条件摸索及优化。

4. 高通量的酵母转化筛选平台,丰富的酵母蛋白表达经验:很多原核表达的分泌型蛋白会出现不溶或包涵体无活性情况,选择酵母表达系统则可避免这些问题,成功表达蛋白。

5. 大规模生产:可满足每批次1-4000 L的生产规模。

6. 一站式服务:基因设计及优化、蛋白表达条件优化、组成型表达菌株构建、蛋白纯化及后续加工处理、数据及报告整理。

服务内容


服务名称

服务内容

服务周期

表达体系选择

表达载体:pPIC9k、pPIC3.5、pPICZαA、 pAO815、pGAPZα、pYES2/NTA

表达菌株:GS115、KM71、X33、INVSC1

 

表达载体构建

基因优化及设计,合成基因及亚克隆

2-4周

表达及纯化测试

质粒线性化、转化、抗性平板筛选、PCR鉴定或梯度加压筛选、表达分析鉴定(SDS-PAGE and/or WB)、最优条件100mL扩大及纯化测试、标签去除测试(可选)

3-6周

1-10L表达及纯化

蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB 鉴定纯化后蛋白、MS鉴定(可选)包涵体变复性(可选)、标签去除(可选)

2-3周

大规模发酵与纯化

蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白Buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB 鉴定纯化后蛋白、MS鉴定(可选)

10-20L

3-4周

20-50L

4-5周

50L 以上

6-12周


服务套餐

基础套餐ata-1031:

针对一个质粒构建,测试20个阳性克隆,最佳克隆进行纯化测试。

增强套餐ata-1032:

针对一个质粒构建,测试20个阳性克隆后,挑选最佳2株克隆进行表达条件优化,最佳克隆及最佳表达条件进行纯化测试。

加压套餐ata-1033:

针对一个质粒构建,转化后抗生素加压筛选,挑选10株克隆进行表达条测试,挑选最佳2株克隆进行表达条件优化,最佳克隆及最佳表达条件进行纯化测试。

表达案例