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092021-10

蛋白分泌表达,可以用枯草芽孢杆菌来帮忙

枯草芽孢杆菌(学名:Bacillus subtilis),是一种广泛应用在工业生产中的革兰氏阳性细菌。和大肠杆菌不同,枯草芽孢细菌是没有外膜的,可以直接将其分泌的蛋白放入培养基中,相对而言,是一种理想的原核蛋白分泌表达细胞株。既然它有如此之大的潜能,那么,它具体表现在哪些方面呢?且听普健生物为你详细解读。


首先,枯草芽孢细菌为食品级安全等级,为欧洲食品安全局认定,可用于食品发酵,在很多食品工艺中都会见到它的身影。相对于大肠杆菌而言,它的细胞壁组成更加地简单,在药用蛋白表达的纯化中,还可以省去去除内毒这一步,操作更加的简单。

虽然说这两种杆菌都可以短时间内表达大量的蛋白,但是,在后期的发酵过程中,大肠杆菌需要对收集的菌体进行破胞处理,而枯草芽孢杆菌则只需要简单处理发酵上清,就能获得较纯的蛋白,并且表达的多数蛋白具备天然构象和生物活性。

那么,潜力无穷的枯草芽孢杆菌有不足之处吗?答案是肯定的。比如,对自身胞外的蛋白酶表达产物的降解、遗传操作相对更为困难;外援蛋白有时候得不到有效表达等,但是,瑕不掩瑜,也一定会有办法予以解决。普健生物可以成功避免如上的问题,使得外援蛋白在枯草芽孢杆菌上得到有效的表达,这主要得益于普健生物的三大优势上:

一、拥有的多种枯草芽孢杆菌表达宿主中,1012 wild type宿主菌是最常用到的,可作为胞内和胞外表达的通用菌;

二、使用的pHT系列载体拥有枯草芽孢杆菌的σA-依赖性的强启动子,配以groE启动子和lac操纵子,能够通过IPTG诱导来启动外源基因的表达。

三、通过优化电转条件,将其用于枯草芽孢杆菌的转化,可以有效缩短转化时间并使转化阳性率达到90%以上。

相比大肠杆菌而言,枯草芽孢杆菌现阶段的表达系统虽然不是很完善,但是,随着我们的不断研究,很多不足之处都将得到很好的解决。相信在不久的将来,它会因为它的特性而大放异彩。毕竟,它表达周期短、成本低、表达量高的优势,还是非常吸引人的。