BSA酶联免疫检测试剂盒

所需仪器：

酶标仪(波长450nm)，10μL、100μL、1mL移液器，300μl多道移液器，移液器吸头、37℃恒温水浴箱。

操作步骤：

将浓缩洗涤液用蒸馏水做10倍稀释。

取出包被有抗BSA的96孔酶标板在室温放置回温。标准品各浓度做平行两孔，50μL/孔加入酶标板中。加待检样品、内部参比，各两孔，50μL/孔。然后将酶标记抗体用酶标抗体稀释液做1:100稀释，加入各反应孔，100μL/孔(酶标记抗体用多少稀释多少，现用现配)。加样过程须在15分钟内完成。

置室温20~24℃避光反应1小时，用洗涤液洗涤四遍，拍干。

用移液器加TMB底物显色液100μL/孔，请勿震荡，室温20~24℃避光反应10分钟。

用移液器加终止液100μL/孔，稍微震荡5s混匀。

在酶标仪450nm波长处读数。

注意事项：

如样品中BSA含量高于32ng/mL，可将样品做适当稀释。

样品如为冻干制剂，应用样品稀释液充分溶解混匀。

反应时应将整板放入洁净的密闭空间中，为防止反应孔中落入异物。

洗涤拍干后，应消除各孔内残余的气泡。

开封后，将未使用的板条放回加入干燥剂的密封塑料袋中，置4℃密闭保存。

在操作过程中，所使用的移液器吸头、洗涤机(瓶)、器皿等均应严格避免被有BSA的环境和物品污染。

结果判定：

实验有效参数：

实验结果须满足以下有效参数为成立：

0ng/mlOD值≤0.1; 32ng/mlOD值≥0.80; 阳性参考18~22ng/ml; R2≥0.98;

计算：

在EXCEL里面以标准浓度为横坐标，消零OD值为纵坐标作散点图，添加趋势线，再显示曲线方程和R2值，将检测样品OD值消零处理后带入直线方程计算对应的浓度。

判定：

在标准曲线中，设OD0~16ng/mL为区间A;OD16~32ng/mL为区间B;大于OD32 ng/mL为区间C。

如测得的OD值小于标准曲线中2ng/mL对应OD值，则BSA含量测定结果计为小于2ng/mL。

如不同稀释浓度的样本测得的OD值均位于区间A，则最终结果计算取其最低稀释度的测定值。

如不同稀释度的测定值均位于区间B或同时位于区间A和B或同时位于区间B和C，则取其最接近OD16ng/mL的测定值。

如不同稀释度测定值均位于区间C，则需将样本做进一步稀释测定，使其测定值居2~32ng/mL所对应的OD值区间，计算方法按上述7.3.2-4。

如高稀释度测得OD高于低稀释度或未稀释的样本OD，则可能是操作失误或样本中BSA含量过高(HOOK效应)，需重试或调整稀释度。

最终结果要考虑稀释因素(实际BSA含量=计算值X稀释倍数)。

本试剂盒技术指标

检测限和定量限

检测限：零浓度标准品加上两倍的标准差(20个零孔计算值)，本试剂盒检测限计算为0.2ng/mL(ppb)。定量限为标准曲线检测下限，1 ng/mL。

准确度和精密度

计算批内批间变异系数，在高中低三个浓度(20、10、5)下五个重复检测计算批内变异系数，不同时间重复三次计算批间变异系数，CV%均小于10%。

交叉反应

本试剂盒对人血白蛋白，小鼠血清，兔血清，鱼明胶没有交叉反应，而对山羊血清有10%的交叉反应(以相同OD值时BSA和山羊血清的浓度的比值的百分数为准)。

钩状效应

当样品浓度远高于标准曲线最高浓度的时候，会产生HOOK效应，即反应OD值小于32ng/mL的BSA时候的浓度，本试剂盒为500μg/mL以上。

1搜索商品：关键字搜索；分类导航搜索；产品联系：手机/微信同号：15972188750，座机：027-65279366（推荐 ！）

2产品选购：确定好产品信息与规格，向产品客服询问底价

3提交订单：向客服提交收货人信息，选择送货方式，支付方式，发票信息

4产品发货：发票随产品一起发送，耐心等待收货即可

质量保证：

所售产品均经过严格的质量检验，确保所供产品的技术指标与生产厂家的目录、说明书、质检报告上的描述一致，请放心选购。

质量与免责说明：

买方验收产品时，如发现产品短缺、不匹配、包装破损等情况，请保持产品原包装状态，并在收货七个工作日内，以书面方式向我司提出异议。逾期未提出异议视为合格。

买方保管产品时，应按照产品标签、说明书所示保管条件保存，如系保管不当导致产品质量问题，恕不受理。

买方使用产品时。如发现产品质量问题，应在使用初期提出，而非在使用完或快使用完时提出，以备我司回收产品，确认产品质量。如确属质量问题，我司负责调换或退货。发生索赔事宜，我司将在产品价格额度范围内酌情赔偿，恕不受理超出产品本身价值之部分。自收货之日起，超过三个月未反映产品问题，恕不退换。

我司所提供的产品仅限于专业人士的科学研究使用，不得用于临床诊断或者治疗，若有单位或者个人擅自改变我司产品用途，我司不承担任何责任。