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Mycoplasma PCR Test Kit

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ATK00002
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概述(Summary)icon
产品英文名(Product Name)
Mycoplasma PCR Test Kit
产品中文名
支原体PCR检测试剂盒
产品描述(Description)
支原体PCR检测试剂盒是一款具有快速、灵敏、特异性高等特点的支原体检测试剂盒,可用于细胞、培养基、动物血清等的支原体检测。本产品通过聚合酶链式反应技术(PCR)特异扩增支原体16s rRNA 基因保守区域片段,进行支原体检测,能够检测包括M. arthritidis,M. hominis,M. hyorhinis,M. fermentans,M. orale,M. salivarium,M. bovis,M. bovigenitalium,M.pneumoniae,M. pirum等在内的数十种常见支原体。
储存条件(Storage)
储存于-15 ~ -25℃。
运输方式(Shipping)
干冰运输。
Note
For research use only .
使用方法(Standard Operating Procedure)icon

1. 收取待检样品。贴壁细胞:待细胞生长至80%左右即可,使用细胞刮刀刮取细胞(送检细胞不能用消化液消化细胞);悬浮细胞:待细胞生长至80%左右即可直接进入下一步离心;

2. 1000rpm离心5min,弃上清,留100-200μl培养基重悬细胞,沸水浴10min      

3. 将煮沸的细胞悬浮液12000rpm离心3-5min

4. 所得样品取4μl直接用于PCR检测,或冻存于-20℃备用;

注:一般以6孔板接种细胞,当细胞生长至80-90%时即可取样进行检测。培养液中的青霉素和链霉素不会影响检测效果。

5. PCR检测

5.1充分融化PCR反应液,按照下表配制PCR反应体系:

组分

阳性对照组

阴性对照组

实验组

PCR反应液

14μl

14μl

14μl

引物

2μl

2μl

2μl

阳性对照

4μl

-

-

待检样本

-

-

4μl

ddH2O

-

4μl

-

5.2 PCR反应管放入PCR仪,参照以下参数运行PCR反应程序:

程序

运行参数

循环数

预变性

94 5min

-

循环

变性

94  30s

30

退火

55  30s

延伸

72  15s

延伸

72 5min

-

5.3琼脂糖凝胶电泳。

6. 凝胶成像观察

注:支原体阳性细胞扩增片段约270bp

M marker

+  :阳性对照

-  :阴性对照

1-3:检测为阳性的细胞

4-5:检测为阴性的细胞

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