普健生物(武汉)科技有限公司(AtaGenix)

282022-07

助力猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)研究,18种猴痘病毒核心抗原/抗体/试剂盒上线 

  摘要:

  7 月 23 日,WHO召开紧级会议,随后宣布猴痘构成国际关注的全球突发公共卫生事件。截至7月27日,全球已有78个国家和地区报告猴痘病例,合计超过1.8万例,大多数在欧洲。

  猴痘病毒( Monkeypox virus(MPXV)具有正痘病毒的典型形态,形态与正痘病毒一致, 外形为圆角砖形或卵圆形,大小为200~400nm。砖形或卵圆状,外被脂蛋白膜或封套,中间具有两个含蛋白质的侧体,有1个厚膜核心,核心内含很大的双链DNA基因体。猴痘病毒的基因组为双链DNA,长约197kb,基因组末端包含一个相同但方向相反的末端反向重复序列。该病毒包含190个开放阅读框,其中4个位于末端反向重复序列中。

  猴痘病毒核心蛋白:A29L, A35R, B6R, M1R, H3L

  其实痘病毒存在两种形式:成熟病毒粒子(mature virion,MV) 和脂质膜 (extracellular enveloped,EV),EV有一层来自内质网膜的包膜,此包膜在与细胞接触后分解,露出外膜进而直接和细胞膜发生融合,随后进行下游的感染。而MV可以直接和细胞膜进行融合,至少有12种MV参与融合,同时可以通过巨胞饮内吞进入细胞,外膜与内吞体膜在内吞体里融合释放出内膜包绕的病毒核心。复制的场所是带孔洞的内膜中进行,之后孔洞闭合,病毒粒子进行下一步的成熟形成典型的痘病毒哑铃形态,标志MV正式形成。最终完成的病毒粒子可以有两种方式离开细胞:最主要的一种为细胞裂解,MV直接释放。另一种是利用细胞的分泌转运系统,通过高尔基体分泌至细胞外,这种方式会使得病毒额外获得一层被膜产生EV。

  

Fig2.痘病毒复制周期

  普健生物联合法国Proteogenix顶-级科学团队,双方通过对猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)和痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)的基因序列进行深入研究成功设计开发真核系统表达的猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)系列核心蛋白A29L、A35R、B6R、M1R、E8L以及相关具有生物学活性的中和抗体产品,助力疫苗、药物、诊断试剂等不同方向的研究。


  真核表达猴痘核心蛋白及相关中和抗体

  Monkeypox virus/MPXV A29L

  A29L是细胞内成熟病毒(IMV)表面包膜蛋白(与牛痘病毒VACV,A27同源)。溶瘤痘苗病毒(VV)属于痘病毒科中一拥有192kb双螺旋DNA遗传物质的病毒,会在细胞质中繁殖出具有鞘膜的病毒,进而感染其他不同种的哺乳动物细胞及个体.VV中的A27L基因能表达出一14kDa大小的鞘膜蛋白,此蛋白能与细胞表面上的硫酸乙酰肝素(Heparan Sulfate)作用使病毒跟细胞结合并且可催化细胞融合。

  Monkeypox virus/MPXV A29L

  

  Recombinant Monkeypox virus/MPXV A29L Protein

  

  Monkeypox virus/MPXV A35R

  A35R是细胞内包膜病毒粒子(IEV)和细胞外包膜病毒粒子(EEV)的包膜成分,与脊索痘病毒A33R同源。痘苗病毒中的A33R在病毒粒子在细胞间的传播中起着至关重要的作用,是疫苗开发的重要靶点,也有研究表明A35R是猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)血清学检测的潜在靶点。


  Recombinant Monkeypox virus/MPXV A35R Protein

  

  Anti-Monkeypox virus/MPXV A35R Antibody (SAA0287)

  

  Monkeypox virus/MPXV B6R

  B6R是宿主范围蛋白,位于细胞外包膜病毒粒子(EEV)的膜上,与牛痘病毒补体控制蛋白B5同源,参与补体激活的负调节。研究表明B5依赖于与A33或A34的相互作用,以定位到细胞内包膜的位点,并能相互结合释放到细胞外病毒体的包膜中。B5对于有效生产感染性EV至关重要,A33,A34,B5三者复合物在ER退出以及三种糖蛋白正确定位到包裹的细胞内部位中起作用。


  Recombinant Monkeypox virus/MPXV B6R/SL-159 Protein

  

  Monkeypox virus/MPXV M1R

  M1R与牛痘病毒L1蛋白同源,是一种在成熟IMV颗粒表面发现的跨膜蛋白。由L1R ORF编码,高度保守,参与病毒粒子组装,在病毒进入和成熟过程中发挥重要作用。L1是诱导低pH触发的细胞-细胞融合所必需的,且对牛痘病毒复制至关重要。


  Recombinant Monkeypox virus/MPXV M1R Protein

  

  Anti-Monkeypox virus/MPXV M1R Antibody

  

  Monkeypox virus/MPXV E8L

  E8L是病毒入侵宿主细胞重要基因,在病毒入侵宿主完成复制的过程中作为MV的细胞表面结合蛋白与细胞表面的硫酸软骨素结合,以提供病毒粒子附着在靶细胞上。有研究表明利用siRNA技术能有效拮抗Monkeypox virus的A6R和E8L基因,由此构建siA6-a和si8 -d能破坏MPV复制。


  Recombinant Monkeypox virus/MPXV E8L Protein

  

  Anti-Monkeypox virus/MPXV E8L Antibody

  

  Monkeypox virus/MPXV H3L

  H3L是一种324个AA长的糖基转移酶,位于病毒包膜上,在与宿主细胞的附着和随后的痘病毒进入中起关键作用。研究表明,天花疫苗诱导的抗体与H3蛋白结合,分化簇 (CD8)+ T细胞将H3L识别为抗原,表明其免疫学意义。


  Recombinant Monkeypox virus/MPXV H3L Protein

  

  在完成上述猴痘病毒的核心抗原,抗体研发的同时,猴痘病毒(Monkeypox virus/MPXV )其他抗原系列C19L,D13L,B2R/Hemagglutinin,A44R,E8L,F12L/MPXVgp044,A26L,A27L,B5R,A33R,A36R,D14L,A14L,B21R和I1L也已完成了抗原和多抗研发工作,目前全部现货库存。

  我们还有在研发配对猴痘病毒(Monkeypox virus/MPXV )相关试剂盒系列;

Cat. #Product name
KAV13401Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit (A29L)
KAV13301Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit(M1R)
KAV12701Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit(H3L)
KAV13201Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit(E8L)
KAV13101Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit(A35R)
KVV13401Monkeypox Virus (MPXV) A29L Antigen ELISA Kit
KVV13301Monkeypox Virus (MPXV) M1R Antigen ELISA Kit
KVV12701Monkeypox Virus (MPXV) H3L Antigen ELISA Kit
KVV13201Monkeypox Virus (MPXV) E8L Antigen ELISA Kit
KVV13101Monkeypox Virus (MPXV) A35R Antigen ELISA Kit


  参考文献:

  [1]Subunit recombinant vaccine protects against monkeypox. J Immunol. 2006 Aug 15;177(4):2552-64. doi: 10.4049/jimmunol.177.4.2552. PMID: 16888017.

  [2]Outbreak of human monkeypox in Nigeria in 2017-18: a clinical and epidemiological report. Lancet Infect Dis. 2019 Aug;19(8):872-879. doi: 10.1016/S1473-3099(19)30294-4. Epub 2019 Jul 5. PMID: 31285143.

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