说到稳转细胞株的构建，我们的第一反应往往是一个字“难”，它的构建相比而言，要困难很多。我们知道，外源基因的表达主要分为两大类：瞬时表达和稳定表达。瞬时表达虽然说所需的人力和物力较少，但是存在不小的局限性，比如因为摄入率和表达水平的不同，通常会出现不长久且不稳定的现象;而稳定表达，则可实现宿主细胞的长期表达。

　　不过，由于外源基因整合进宿主的几率往往很小，经常出现随机整合的情况，且会受到周围染色体原件的影响，表达的水平也和整合的位置有关。所以，想要获得高产量的稳转细胞株，我们往往需要进行大量的筛选。

　　不过还好，G418筛选系统还是一个非常给力的选择。同时，改造CHO细胞也能更好地表达外源蛋白。但是，它又存在着如下的缺陷：因为表达细胞仅限DHFR缺陷型细胞，同时重复筛选抗性细胞既费时又费力，去除选择压力后，扩增基因不稳定;选择压力下，扩增基因的大小和结构处在不断变化之中。所以，通过之后的不断研究，大家发现了GS扩增系统等一系列更多的筛选系统。

　　你以为这样就完了?NONONO，在这些强大的系统面前，我们依然要做如下一系列的工作：

　　一、载体构建

　　二、细胞转染

　　三、目的蛋白初步检测

　　四、药物筛选

　　五、目的蛋白再次检测

　　六、单克隆筛选及鉴定

　　七、扩大培养

　　八、稳定表达细胞株稳定性定量检测

　　九、稳定表达细胞株质量控制

　　十、冻存细胞工作库

　　总体来说，各个阶段的实验相对来说技术并不是特别的困难，不过，却存在着一着不慎满盘皆输的隐患，但也架不住坚韧不拔的人们的持续改进。普健生物就是这样，竭尽心力地为您解决这类问题，为您提供专业的技术支持。实验困难?过程复杂?害怕成功率不高?找我们，那就一定不会错。